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  • NAGO SHARE ▏淺談自由基清除率試驗(yàn)在抗皺功效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用
    2022-12-27


    產(chǎn)生皺紋是皮膚衰老的特征之一。研究表明,人們提出了很多衰老學(xué)說(shuō),其中活性氧自由基學(xué)說(shuō)是較多支持的學(xué)說(shuō)。



    人體正常生理代謝和環(huán)境影響,如紫外線照射、環(huán)境污染等,都會(huì)導(dǎo)致活性氧(ROS)的產(chǎn)生,過(guò)量的自由基會(huì)導(dǎo)致皮膚衰老等問(wèn)題產(chǎn)生。減少自由基的產(chǎn)生和清除老化代謝物是減緩皮膚衰老以及皺紋產(chǎn)生的方法之一


    化妝品抗皺功效測(cè)試方法分為人體法和體外法兩大類,而體外法有生物化學(xué)法、細(xì)胞法、表皮模型法、斑馬魚胚胎法等。其中生物化學(xué)法使用相對(duì)便捷、成本低、易于實(shí)現(xiàn)、速度快,可用于抗皺原料的高通量篩選。如DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、超氧陰離子自由基清除法等。

    一、DPPH自由基清除法



    DPPH乙醇溶液呈紫紅色,在519 nm處有最大吸收波長(zhǎng)。當(dāng)加入自由基清除劑時(shí),DPPH自由基被清除,溶液逐漸變淺,在519 nm 處的吸光度隨之減小。溶液顏色越淺,其吸光度值越低,自由基清除劑清除DPPH自由基的效果越好。

    二、ABTS自由基清除法



    ABTS與過(guò)硫酸鉀反應(yīng)生成綠色的ABTS+。具有抗氧化性的物質(zhì)可抑制ABTS+的生成,ABTS+在可見光區(qū)最大吸收峰734 nm處,測(cè)定吸光度,其光度值的大小可定量得出反應(yīng)物質(zhì)的自由基清除能力。即其吸光度值越低,具有抗氧化性的物質(zhì)清除ABTS自由基的能力越強(qiáng)。

    三、超氧陰離子自由基清除法



    鄰苯三酚在堿性條件下能迅速發(fā)生氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng),釋放出超氧陰離子自由基(O2—),O2—進(jìn)一步加速鄰苯三酚的氧化,生成在320 nm 處有特殊吸收的中間產(chǎn)物。若在反應(yīng)體系中加入抗氧化物,可清除O2—,阻止中間產(chǎn)物的積累,使得在320 nm處的吸光度減小。


    四、羥自由基清除法



    水楊酸與羥自由基(·OH)反應(yīng)生成可 2,3- 二羥基苯甲酸,它在 510 nm處有最大吸收波長(zhǎng)。利用過(guò)氧化氫(H2O2)與七水硫酸亞鐵(FeSO4·7H2O反應(yīng)生成·OH,加入具有清除自由基能力的物質(zhì),可抑制2,3-二羥基苯甲酸生成,降低 510 nm 處的吸光度。

    自由基清除劑或抗氧化劑可以提供電子、抑制氧化。通過(guò)吸收自由基的同時(shí),細(xì)胞不受攻擊,達(dá)到清除自由基目的,減少皺紋的產(chǎn)生,從而達(dá)到減緩皮膚的衰老過(guò)程,化妝品的成品、半成品和原料可以通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)確定其是否具有清除自由基的能力及其能力的強(qiáng)弱。


    以上幾種方法可以計(jì)算樣品清除自由基的清除率,以及計(jì)算其半數(shù)清除濃度(IC50)。通過(guò)進(jìn)行不同樣品的自由基清除能力比較可知,IC50值越小,代表該樣品的清除自由基能力越強(qiáng),從而比對(duì)出不同化妝品成品、半成品或原料清除自由基的能力。


    - 參考文獻(xiàn) -


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